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免疫组化(IHC)——组织染色与定量图像分析服务

Biospective提供高质量的免疫组化染色、切片扫描及脑、脊髓、肌肉与周围神经组织切片的图像分析服务。

我们的免疫组化(IHC)服务

作为一家临床前合同研究组织(CRO),我们为以下机构提供免疫组化染色与分析的合同研究服务:

  • 学术实验室与研究中心
  • 生物技术公司
  • 制药行业

我们在以下领域处于领先地位:

  • 免疫组化染色
  • 整张玻片扫描
  • 数字化组织切片的定量图像分析

我们的团队在以下领域拥有数十年的经验:

  • 脑部
  • 脊髓
  • 肌肉
  • 周围神经
  • 神经节
小鼠脑组织中NeuN的免疫组化图像

小鼠脑组织NeuN免疫组化染色。
采用显色 AEC检测法成年小鼠脑FFPE切片 进行 NeuN 染色,图示 为代表性冠状切片。该染色技术可用于评估神经元密度、皮层结构、区域性神经元分布及疾病相关神经退行性变。

本实验室配备先进的自动化免疫组化/免疫荧光染色设备及高通量全片扫描仪,以最大化检测质量并缩短周转时间。

若您在进行内部研究或与其他供应商合作开展动物模型研究时采集了组织样本,可直接将样本寄送至我方进行染色、切片扫描及 图像 分析。

神经系统疾病小鼠模型 中的免疫组化研究示例

在Biospective,我们常规开展肌萎缩侧索硬化症(ALS)阿尔茨海默病及tau蛋白病帕金森病以及 多发性硬化症(MS)小鼠模型的研究。本文展示了这些模型中免疫组化染色的典型案例。您也可通过提供的链接进一步了解我们针对这些模型的免疫组化服务。

肌萎缩侧索硬化症(ALS)小鼠模型中的免疫组化染色

磷酸化TDP-43在"低多柔比星"rNLS8小鼠中的染色

磷酸化(p409/410)TDP-43在"低多柔比星"rNLS8小鼠中的染色。
Biospective公司"低多柔比星"TDP-43ΔNLS(rNLS8)小鼠模型脑组织切片高倍视野,采用酸性蓝129复染的AEC显色法检测磷酸化TDP-43(p409/410)(Zehntner, 2008)。

在这些ALS模型中,我们常规对大脑和脊髓进行染色检测:

  • 人类TDP-43
  • 磷酸化TDP-43(pTDP-43)
  • 胶质纤维酸性蛋白(GFAP,星形胶质细胞)
  • Iba1(小胶质细胞)
  • ATP5A(线粒体)
  • 脊髓运动神经元(胆碱乙酰转移酶)

本团队已开发出适用于ALS模型的强大图像分析技术:

若您拥有TDP-43模型及/或其他ALS模型(如SOD1、C9orf72、PFN1)的大脑、脊髓、肌肉或其他组织样本,我们乐意与您合作。

我们还能通过血液和脑脊液中的液体生物标志物补充免疫组化染色,例如:

  • 神经丝轻链(NF-L)
  • TDP-43
  • 胶质纤维酸性蛋白(GFAP)
  • 细胞因子(如IL-1βTNF-α
  • 趋化因子
  • PSD-95

您可以在我们的体液与细胞生物标志物服务页面了解更多关于这些生物标志物的信息。

阿尔茨海默病与tau病小鼠模型中的免疫组化染色

2张淀粉样蛋白β和磷酸化tau染色的明场图像

阿尔茨海默病与tau病变小鼠模型脑组织中β淀粉样蛋白与tau蛋白的染色
)9月龄APP/PS1转基因小鼠脑组织高倍镜下观察,经纤维状β淀粉样蛋白染色显示 Aβ斑块 及脑淀粉样血管病变(CAA)。
PS19(P301S)转基因小鼠脑组织高倍镜下图像,该小鼠在注射预成型微管蛋白纤维(PFFs)3个月后,显示局部AT8阳性微管蛋白聚集物及其在受累脑结构中的分布。

在这些阿尔茨海默病与tau病变模型中,我们常规对脑组织进行以下染色:

  • β淀粉样蛋白(多种Aβ抗体)
  • 磷酸化tau蛋白(AT8)
  • 构象改变的tau蛋白(MC1)
  • 胶质纤维酸性蛋白(GFAP,星形胶质细胞)
  • Iba1(小胶质细胞)
  • NeuN(神经元)
  • ASC(炎性体)

我们的团队已为阿尔茨海默病模型开发了强大的图像分析技术,包括:

另请参阅我们的互动演示——在阿尔茨海默病(AD)及AD小鼠模型中,驱动神经退行性变的是Tau蛋白而非β淀粉样蛋白。

若您持有APP/PS1小鼠及其他阿尔茨海默病或tau病变小鼠/大鼠模型( 5xFAD小鼠PS19小鼠、APP KI小鼠/大鼠、JNPL3小鼠、rTg4510小鼠)的脑组织或其他组织样本,我们乐意与您开展合作。

我们还能通过血液、脑脊液或脑组织匀浆上清液中的体液生物标志物补充免疫组化染色,例如:

  • 神经丝轻链(NF-L)
  • Aβ40与Aβ42
  • 总tau蛋白与磷酸化tau蛋白
  • 胶质纤维酸性蛋白(GFAP)
  • 细胞因子(如IL-1βTNF-α
  • 趋化因子
  • APOE4
  • PSD-95

您可以在我们的体液与细胞生物标志物服务页面了解更多关于这些生物标志物的信息。

帕金森病小鼠模型中的免疫组化染色

PFF注射M83小鼠脑组织中pSyn染色的免疫组化图像 

pSyn 染色在PFF注射的M83小鼠脑组织中的应用
Biospective公司 α-突触核蛋白PFF播种与扩散帕金森病小鼠模型 中pSyn129染色的高倍放大图 ,显示 密集 的pSyn阳性聚集物及其在受影响神经元内的局部聚集。

在这些帕金森病模型中,我们常规对脑组织进行以下染色:

  • 磷酸化α-突触核蛋白(pSyn129)
  • 胶质纤维酸性蛋白(GFAP,星形胶质细胞)
  • Iba1(小胶质细胞)
  • NeuN(神经元)
  • 酪氨酸羟化酶(多巴胺能神经元)

本团队已开发出适用于帕金森病模型的强大图像分析技术,包括:

 

若您拥有α-突触核蛋白及其他转基因、敲入、敲除、人源化或可诱导毒素(如6-OHDA、MPTP、鱼藤酮)的帕金森病小鼠或大鼠模型脑组织,我们乐意与您合作。

我们还能通过血液、脑脊液或脑组织匀浆上清液中的体液生物标志物补充免疫组化染色,例如:

您可在我们的体液与细胞生物标志物服务页面了解更多相关信息。

多发性硬化症小鼠模型中的免疫组化染色

明场免疫组化——脱髓鞘与神经炎症模型中的MBP和IBA1表达分析 

脱髓鞘/再髓鞘化及自身免疫介导炎症模型中的MBP与Iba1染色
小鼠脑冠状切片代表图,取自铜绿假单胞菌诱导的脱髓鞘与再髓鞘化小鼠模型 ,经髓鞘基本蛋白(MBP)染色 。 全切片明场成像技术可直观呈现髓鞘完整性及脱髓鞘与再髓鞘 化的 区域分布模式。
实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠模型脊髓横切面代表图,通过Iba1染色检测活化小胶质细胞及浸润巨噬细胞。

在这些多发性硬化症(MS)模型中,我们常规对脑和脊髓进行以下染色:

  • 髓磷脂蛋白(MBP)、脑脊髓球蛋白(MOG)或磷脂酰丝氨酸(PLP)(髓鞘)
  • 胶质纤维酸性蛋白(GFAP,星形胶质细胞)
  • Iba1(小胶质细胞与巨噬细胞)
  • CD3(T细胞)
  • 成熟少突胶质细胞
  • 少突胶质细胞前体细胞(OPC)标记物
  • 轴突损伤标记物

本团队已开发出适用于多发性硬化症模型的强大图像分析技术,包括:

我们还可通过血液、脑脊液或脑组织匀浆上清液中的液体生物标志物来补充免疫组化染色,例如:

您可在我们的体液与细胞生物标志物服务页面了解更多相关信息。

若您拥有来自EAE、铜绿假单胞菌(cuprizone)及其他小鼠或大鼠多发性硬化症模型(如LPC)的脑组织、脊髓或其他组织,我们很乐意与您合作。

神经系统疾病模型中免疫组化染色的总结

模型/疾病

关键免疫组化标记物

典型读数

相关检测指标与服务

ALS

TDP-43、磷酸化TDP-43、胶质纤维酸性蛋白、Iba1、胆碱酯酶

TDP-43病理改变、神经炎症、神经退行性变

运动功能、肌力、肌电图、CT肌肉萎缩、MRI脑萎缩、血清及脑脊液NF-L、神经肌肉接头分析

阿尔茨海默病与tau病

Aβ、pTau(AT8)、MC1、GFAP、Iba1

斑块负荷、tau聚集体、小胶质细胞增生、星形胶质细胞增生

淀粉样蛋白微环境分析、MRI脑萎缩、体液生物标志物

帕金森病

磷酸化Syn129、多巴胺能神经元、胶质纤维酸性蛋白、Iba1、神经元核抗原

磷酸化突触负荷、多巴胺能神经元丧失、神经炎症、神经退行性变

睡眠、运动功能、MRI脑萎缩、血及脑脊液NF-L

多发性硬化症

髓鞘蛋白/脑脊髓球蛋白/磷脂酰丝氨酸、Iba1、胶质纤维酸性蛋白、CD3

脱髓鞘/再髓鞘化、轴突损伤、神经炎症、外周炎症浸润

临床评分(如EAE评分 )、组织与体液细胞因子分析、MRI(MTR分析)、血清及脑脊液NF-L

本表汇总了ALS、阿尔茨海默病及tau病变、帕金森病和MS模型中关键免疫组化标记物、典型读数及相关终点与服务。

什么是免疫组化(IHC)?

免疫组化(IHC)神经 科学前临床研究中的 关键技术 ,可实现组织内特定蛋白质的可视化与定量分析。通过使用多种报告系统标记的 抗体 ,IHC技术能绘制蛋白质定位、表达水平及细胞分布图谱Velasco-Vales, 2022;Mebratie, 2024。 在神经退行性疾病研究中, IHC技术对于表征蛋白质错误折叠、神经炎症、神经元丧失、突触功能障碍及神经回路病理至关重要为评估疾病进展和治疗干预提供关键支持。

小鼠黑质的免疫组化(IHC)染色

小鼠黑质多巴胺能细胞体与突触()及神经元核()的免疫组化(IHC)染色。

在Biospective,我们的实验室采用 多台自动化免疫组化/免疫荧光染色仪,确保:

  • 高重现性
  • 低变异性
  • 快速周转
  • 大规模样本组间最佳一致性

我们 为神经疾病 啮齿类 动物 模型提供 经过充分验证的免疫组化检测方案 ,并可根据您的研究需求 定制专属染色方案。经验丰富的科研团队与技术人员确保每项方案均经过 优化 ,以实现可重复性、高灵敏度及高质量定量分析。

免疫组化(IHC)与免疫荧光(IF)有何区别?

特征

免疫组化(IHC)

免疫荧光(IF)

多重检测

有限(1-2个标记物)

高(多种荧光染料)

检测

酶促显色法

荧光团发射

可视化

明场

宽场荧光显微镜/共聚焦显微镜

染料

DAB、AEC、Fast Red

FITC、TRITC、Alexa Fluor、DAPI

信号

永久性

易光漂白

定量

半定量

高度定量

背景

可能存在自发荧光

灵敏度

中等

样本

福尔马林固定石蜡包埋组织或冷冻组织

FFPE 和冷冻组织;培养细胞

输出

比色法

荧光

免疫组织化学(IHC)与免疫荧光(IF)在关键指标上的特性对比,包括多重检测、信号检测、可视化、染料、信号强度、定量分析、背景干扰、灵敏度、样本类型及检测结果。

了解更多关于我们的免疫组化(IHC)服务

常见问题解答

Biospective使用哪种复染剂?


Biospective使用哪种显色剂?


Biospective采用何种抗原修复方法?


您能 为我的研究验证 新型抗体


你能进行盲法定量分析吗?


能否通过将β淀粉样蛋白与普鲁士蓝共同染色来检测微出血?


MC1与AT8有何不同?


我该如何选择适合学习的标记笔?


参考文献


关键词


相关内容

关于我们免疫组化(IHC)服务的最新信息,以及在神经退行性疾病动物模型中评估治疗药物的最佳实践。

更多信息

请告诉我们您的兴趣所在。我们的团队将很乐意与您探讨!

请发送电子邮件至 [email protected] 或填写并提交以下表格。

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