我们的免疫荧光（IF）染色与分析服务
在Biospective，我们的团队成员精通以下领域：
- 多重免疫荧光染色
- 荧光全切片扫描
- 组织切片的自动化定量分析
作为一家临床前神经科学合同研究组织，Biospective为以下领域提供多重免疫荧光染色与分析研究服务：
- 生物技术行业
- 制药公司
- 研究机构与实验室
我们专注于以下组织的染色与分析：
- 大脑
- 脊髓
- 肌肉
- 周围神经
- 神经节
野生型小鼠海马体中的神经元与胶质 细胞染色。
野生型小鼠冠状切片的海马代表区域。NeuN阳性 神经元 以 绿色 显示 ，GFAP阳性 星形胶质细胞 呈 蓝色， Iba1阳性 小胶质细胞显红，细胞核经 DAPI反染 。该染色突显了海马体内神经元群体与星形胶质细胞及小胶质细胞的分布格局。
我们的实验室采用尖端的高通量自动化免疫荧光染色仪器和全片扫描仪，以最大化质量并缩短周转时间。
若您在内部研究或与其他供应商合作的动物模型研究中采集了脑组织、脊髓、肌肉、周围神经或神经节，可直接将样本寄送给我们进行染色、切片扫描及 图像 分析。
神经系统疾病模型中的多重免疫荧光研究
在Biospective，我们常规开展ALS、阿尔茨海默病与Tau病变、帕金森病及多发性硬化症（MS）小鼠模型的研究。本文通过这些模型展示多重免疫荧光染色的典型案例。您也可通过提供的链接，进一步了解我们针对这些模型的多重免疫荧光（mIF）服务。
mIF染色在ALS（肌萎缩性侧索硬化症）小鼠模型中的应用
TDP-43病理学与rNLS8 （TDP-43ΔNLS） 小鼠运动皮层中的胶质细胞激活。
rNLS8小鼠冠状FFPE切片中代表性运动皮层区域。磷酸化TDP-43（pTDP-43）呈 黄色 ，人源TDP-43（hTDP-43）呈 红色，Iba1阳性小胶质细胞呈 绿色， 的GFAP阳性星形胶质细胞 呈紫色。 活化小胶质细胞延伸突触接触神经元胞体及TDP-43聚集区域，星形胶质细胞则 呈现 反应性GFAP上调。此多重染色技术清晰呈现病理性TDP-43聚集现象，并同步揭示rNLS8 ALS模型特有的胶质细胞反应特征。
在这些ALS模型中，我们常规对大脑和脊髓进行染色检测：
- 人类TDP-43
- 磷酸化TDP-43（pTDP-43）
- 胶质纤维酸性蛋白（GFAP，星形胶质细胞）
- Iba1（小胶质细胞）
- ATP5A（线粒体）
- 脊髓运动神经元（胆碱乙酰转移酶）
我们还使用以下试剂对肌肉进行神经肌肉接点（NMJ）染色：
- α-蝮蛇毒素
- SV2A
- β-III-微管蛋白
本团队已开发出适用于ALS模型的强大图像分析方法：
- 欢迎查阅我们的互动演示——基于"低多柔比星"TDP-43ΔNLS小鼠ALS模型的脑组织多色免疫荧光分析。
- 访问我们的"图像互动"——TDP-43ΔNLS (rNLS8) ALS小鼠模型中的神经肌肉接点(NMJ)去神经支配。
若您拥有TDP-43模型及/或其他ALS模型（如C9orf72、SOD1、PFN1）的大脑、脊髓、肌肉或其他组织样本，我们乐意与您合作。
我们还能通过血液和脑脊液中的液体生物标志物补充免疫组化染色，例如：
您可以在我们的体液与细胞生物标志物服务页面上了解更多关于这些生物标志物的信息。
阿尔茨海默病及tau病变小鼠模型中的微粒体铁蛋白染色
野生型 小鼠 注射AAV-hTau后的病理性Tau蛋白聚集物 。
野生型小鼠脑部注射 AAV-hTau后冠状切片中梨状皮层区域的代表性图像 。磷酸化tau蛋白 （AT8） 呈 绿色，Iba1阳性小胶质细胞呈 红色，GFAP阳性星形胶质细胞呈 紫色，细胞核经 DAPI反染 。活化的小胶质细胞向tau阳性神经元延伸突触，星形胶质细胞则 呈现 反应性GFAP上调。
APP/PS1转基因 小鼠脑 中的β 淀粉样蛋白病理与胶质细胞活化
APP/PS1转基因 小鼠脑 的代表性冠状切片 。 OC抗体阳性的 Aβ 纤维 以 绿色 显示 ， GFAP阳性的星形胶质细胞呈 红色， Iba1阳性的小胶质细胞呈 黄色，细胞核经 DAPI （蓝色） 反染 。 活化的小胶质细胞向淀粉样沉积物延伸突触，星形胶质细胞则 呈现 反应性GFAP上调。此多重染色技术清晰揭示了纤维状淀粉样β蛋白的聚集，以及在APP /PS1阿尔茨海默病模型 受累区域中协调的小胶质细胞与星形胶质细胞反应 。
在这些阿尔茨海默病与tau病变模型中，我们常规对脑组织进行以下染色：
- β淀粉样蛋白（多种Aβ抗体）
- 磷酸化tau蛋白（AT8）
- 构象改变的tau蛋白（MC1）
- 胶质纤维酸性蛋白（GFAP，星形胶质细胞）
- Iba1（小胶质细胞）
- NeuN（神经元）
- ASC（炎性体）
我们的团队已为阿尔茨海默病模型开发了强大的图像分析技术，包括：
- 淀粉样斑块特征分析（如尺寸、类型[致密型、弥漫型、纤维型]、数量统计）；详见资源库：阿尔茨海默病中β淀粉样蛋白斑块分析
- 炎症微环境分析；详见创新成果：APP/PS1阿尔茨海默病小鼠模型中的β淀粉样蛋白与炎症微环境
- 反应性星形胶质细胞分析；详见创新成果：《星形胶质细胞与阿尔茨海默病β淀粉样蛋白小鼠模型》
另请参阅我们的互动演示——在阿尔茨海默病（AD）及AD小鼠模型中，驱动神经退行性变的是Tau蛋白而非β淀粉样蛋白。
若您拥有APP/PS1小鼠及其他阿尔茨海默病或tau病变小鼠/大鼠模型（如PS19小鼠、5xFAD小鼠、APP基因敲入小鼠/大鼠、JNPL3小鼠、rTg4510小鼠）的脑组织或其他组织样本，我们乐意与您开展合作。
我们还能通过血液、脑脊液或脑组织匀浆上清液中的体液生物标志物补充免疫组化染色，例如：
您可以在我们的体液与细胞生物标志物服务页面了解更多关于这些生物标志物的信息。
帕金森病小鼠模型中的微粒体铁蛋白染色
磷酸化α-突触核蛋白病理学与 M83+/-小鼠梨状皮层中的小胶质细胞参与
来自 M83转基因小鼠 （过表达人源A53T α-突触核蛋白）的冠状FFPE切片中梨状皮层区域示意图， 该小鼠被注射了 α -突触核蛋白预成型纤维（PFFs）。 磷酸化α-突触核蛋白（pSyn129）呈 绿色，NeuN阳性神经元核呈 蓝色，Iba1阳性小胶质细胞呈 红色。 累积 的 pSyn突显了PFF诱导的神经元群体内α-突触核蛋白病理，小胶质细胞则向 pSyn负荷 的神经元胞体及周围神经丛 延伸突触 。该多重染色技术揭示了PFF 注射 M83小鼠 梨状皮层内诱导的α-突触核蛋白聚集与小胶质细胞活化的关联机制 。
在这些帕金森病模型中，我们常规对脑组织进行以下染色：
- 磷酸化α-突触核蛋白（pSyn129）
- 胶质纤维酸性蛋白（GFAP，星形胶质细胞）
- Iba1（小胶质细胞）
- NeuN（神经元）
- 酪氨酸羟化酶（多巴胺能神经元）
本团队已开发出适用于帕金森病模型的强大图像分析技术，包括：
- 激活的小胶质细胞；详见创新成果：α-突触核蛋白PFF小鼠帕金森病模型中的小胶质细胞激活机制
若您拥有α-突触核蛋白及其他转基因、敲入、敲除、人源化或可诱导毒素（如MPTP、6-OHDA、鱼藤酮）的帕金森病小鼠或大鼠模型，我们乐意与您合作。
我们还能通过血液、脑脊液或脑组织匀浆上清液中的体液生物标志物，对免疫组化染色进行补充分析，例如：
- 神经丝轻链（NF-L）[另请参阅资源库——帕金森病模型中的神经丝轻链]
- 胶质纤维酸性蛋白（GFAP）
- 细胞因子（如IL-1β、TNF-α）
- 趋化因子
- PSD-95
您可在我们的体液与细胞生物标志物服务页面了解更多相关信息。
多发性硬化症小鼠模型中的mIF染色
杯里嗪脱髓鞘模型中的髓鞘缺失
杯里嗪诱导脱髓鞘小鼠脑组织冠状FFPE切片中代表性胼胝体区域 。髓鞘碱性蛋白 （MBP） 以 红色 显影 ，突显髓鞘缺失与碎裂区域，细胞核则 经DAPI （蓝色） 反染 。此染色法清晰勾勒出铜绿假单胞菌处理后致密的髓鞘结构显著减少的特征，并可评估受累白质束中脱髓鞘的严重程度。
在这些多发性硬化症（MS）模型中，我们常规对脑和脊髓进行以下染色：
- 髓磷脂蛋白（MBP）、脑脊髓球蛋白（MOG）或磷脂酰丝氨酸（PLP）（髓鞘）
- 胶质纤维酸性蛋白（GFAP，星形胶质细胞）
- Iba1（小胶质细胞与巨噬细胞）
- CD3（T细胞）
- 成熟少突胶质细胞
- 少突胶质细胞前体细胞（OPC）标记物
- 轴突损伤标记物
本团队已开发出适用于多发性硬化症模型的强大图像分析技术，包括：
- 轴突损伤与病变标志物；详见资源库：实验性自身免疫性脑脊髓炎与轴突损伤
我们还可通过血液、脑脊液或脑组织匀浆上清液中的液体生物标志物来补充免疫组化染色，例如：
- 神经丝轻链（NF-L）[另请参阅我们的资源——实验性自身免疫性脑脊髓炎与轴突损伤]
- 胶质纤维酸性蛋白（GFAP）
- 细胞因子（如IL-1β、TNF-α）
- 趋化因子
- PSD-95
您可在我们的体液与细胞生物标志物服务页面了解更多相关信息。
若您拥有来自EAE、铜绿假单胞菌（cuprizone）及其他小鼠或大鼠多发性硬化症模型（如LPC）的脑组织、脊髓或其他组织，我们很乐意与您合作。
什么是多重免疫荧光（mIF）？
多重免疫荧光（mIF）是一种强大的技术，通过使用与光谱特性不同的荧光染料 （如Alexa Fluor系列：AF488、AF555、AF647、AF750） 偶联的抗体，可在同一组织切片中同时检测多个蛋白质靶标 。 通过保留空间关联性 ，mIF 技术可绘制细胞共表达、亚细胞定位、细胞间相互作用及微环境组织结构的精细图谱。该方法能直接可视化 大脑、脊髓、肌肉等组织区域内 多种标记物（如致病性蛋白聚集体、活化胶质细胞及神经元群体） 间的相互作用。 在神经退行性疾病研究中 ，mIF对解析复杂病理机制至关重要——包括疾病蛋白的共聚集、异质性胶质细胞表型、小胶质细胞-神经元 接触/相互作用及神经炎症反应——并能支持疾病进展的定量评估、空间生物标志物分析及治疗效果评估（Hickey, 2021;Park, 2022;Bull, 2024）。
小鼠腓肠肌神经肌肉 接点（NMJ） 可视化。
（左） 小鼠 腓肠肌代表性切片。 α-蝮蛇毒素（BTX） 标记的乙酰胆碱（ACh） 受体 呈绿色，突触囊泡蛋白 SV2A和 微管蛋白 呈 红色，细胞核经 DAPI （蓝色）反染。 该染色技术可清晰呈现肌纤维内神经肌肉接头结构，包括突触前与突触后区室。
（右）高倍放大 神经肌肉接头图像，显示部分 及 完全受神经支配的接头结构。
小鼠脊髓运动神经元 可视化。
小鼠脊髓代表性切片。 GFP表达神经元 呈 绿色 ，ChAT阳性胆碱能神经元 呈 红色。 细胞核 经DAPI 反染 （蓝色）。
Biospective从动物模型中采集组织、进行组织切片、多重免疫荧光染色、全片扫描及定量图像分析的流程示意图。
小鼠黑质多巴胺能细胞体与突触（左）及神经元核（右）的免疫荧光（IF）染色。
在Biospective，我们的实验室采用 多台自动化免疫组化/免疫荧光染色仪，确保：
- 高重现性
- 低变异性
- 快速周转
- 大规模样本组间最佳一致性
我们 为神经疾病 啮齿类 动物模型提供 经过充分验证的多重免疫荧光检测方案 ，并可根据您的研究需求 定制专属染色方案。由资深科学家和技术人员组成的研发团队确保每项方案均经过 优化 ，以实现可重复性、高灵敏度及高质量定量分析。
了解更多关于我们的多重免疫荧光检测服务
探索更多我们的免疫荧光染色服务
相关内容
关于我们免疫组化（IHC）服务的最新信息，以及在神经退行性疾病动物模型中评估治疗药物的最佳实践。
阿尔茨海默氏症中的淀粉样蛋白斑块分析
人类和阿尔茨海默病动物模型（转基因小鼠和大鼠）脑组织切片中的Aβ斑块分类和量化方法概述。
TDP-43 ΔNLS (rNLS8) 小鼠用于ALS药物研发
该资源提供了有关使用ΔNLS（deltaNLS、hTDP-43ΔNLS、hTDP-43DeltaNLS、dNLS、TDP43 NLS、rNLS8）TDP-43 ALS转基因小鼠模型进行临床前治疗研究的信息。