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separatorJunction neuromusculaire (NMJ) – Services de marquage tissulaire et d'analyse d'images pour les échantillons musculaires

Junction neuromusculaire (NMJ) – Services de marquage tissulaire et d'analyse d'images pour les échantillons musculaires

Biospective propose une marquage de pointe de la jonction neuromusculaire grâce à l'immunofluorescence multiplexe et à l'analyse d'images de l'innervation et de la dénervation.

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Découvrez ce service :

Quels services Biospective propose-t-il pour la marquage et l'analyse des jonctions neuromusculaires (JNM) ?

La jonction neuromusculaire (JNM) est affectée dans un large éventail de maladies neurologiques et musculaires, notamment :

L'analyse quantitative des caractéristiques de la jonction neuromusculaire (JNM), telles que l'innervation et la dénervation de la JNM, est essentielle pour comprendre la progression de la maladie et la réponse à l'intervention thérapeutique, en particulier en ce qui concerne la pathologie de la SLA et la pathologie de la JNM dans d'autres modèles de maladies neuromusculaires. Notre équipe chez Biospective a développé des méthodes robustes pour la marquage immunofluorescente multiplexe et l'analyse quantitative d'images de JNM à partir de coupes de tissu musculaire, y compris l'optimisation pour les études sur la jonction neuromusculaire dans la SLA.

Quel est le processus de Biospective pour la marquage et l'analyse des jonctions neuromusculaires ?

Notre processus de marquage et d'analyse des jonctions neuromusculaires

Chez Biospective, nous avons mis en place un processus standardisé et hautement reproductible en plusieurs étapes pour la marquage et l'analyse des jonctions neuromusculaires à partir de muscles fixés au formol :

 

1. Sectionnement des tissus

  • Nous incluons les muscles dans de l'OCT avant de les congeler et de les stocker à-80 °C.
  • Nous produisons des coupes de tissus fixés et congelés de haute qualité à l'aide de microtomes spécialement équipés.
  • Les coupessont montées surdes lames de verre haute performance afin de garantir leur adhérencependant le processus de marquage.

2. Immunofluorescence multiplexe marquage NMJ des coupes tissulaires

  • Nous effectuons une marquage multiplex pour :
    • Terminaison présynaptique (SV2A)
    • Plaques motrices (alpha-bungarotoxine)
    • Axone innervant (bêta-III-tubuline)
  • La marquage est réalisée à l'aide d'un instrument IHC/IF automatisé à haut débit afin de garantir la cohérence et la reproductibilité.

3. Numérisation des lames

  • Les sections entières sont numérisées à une résolution spatiale ultra-élevée à l'aide d'un scanner de lames numériques.
  • Les images obtenuessont utilisées à la fois pour la visualisation et l'analyse quantitative.

4. Segmentation d'images, quantification NMJ et analyse NMJ

  • Nos scientifiques spécialisés en imagerie ont développé des méthodes de segmentation avancées et entièrement automatisées pour les terminaisons présynaptiques (SV2A), les plaques motrices (α-bungarotoxine) et les axones innervants (β-III-tubuline).
  • Nosoutils d'analyse des jonctions neuromusculaires permettent une quantificationà haut débit et à faible biais des jonctions neuromusculaires .
  • Nous dérivons une série de mesures quantitatives à partir des images segmentées afin de caractériser la morphologie et l'état fonctionneldes jonctions neuromusculaires

Directives relatives au prélèvement, à la préparation et à l'expédition des échantillons

Nous fournissons une assistance complète afin de garantir l'intégrité des échantillons et la fiabilité des données :

  • Collecte des échantillons : les animaux doivent être perfusés avec du PBS froid et/ou du formol tamponné neutre à 10 %, et les muscles doivent être soigneusement extraits.
  • Préparation des échantillons : les tissusmusculaires doivent être brièvement fixés dans du formol tamponné neutre à 10 % et congelés rapidement. 
  • Expédition des échantillons : les échantillons doivent être expédiés dans de la glace carbonique à l'aide de conteneurs isothermes, en évitant les cycles répétés de congélation-décongélation.

Schéma illustrant les principaux composants de la jonction neuromusculaire (JNM), notamment les terminaisons présynaptiques des motoneurones, la plaque motrice postsynaptique, les cellules de Schwann terminales et les kranocytes. Abréviations : jonction neuromusculaire (JNM), acétylcholine (ACh), récepteursde l'ACh (AChR).

Qu'est-ce que la jonction neuromusculaire (JNM) ?

La jonction neuromusculaire (JNM) est une synapse spécialisée qui permet la communication entre les motoneurones et les fibres musculaires squelettiques, permettant ainsi des contractions musculaires précises . Les terminaisons présynaptiques des motoneurones libèrent de l'acétylcholine (ACh) en réponse à des signaux électriques, qui se lie aux récepteurs de la plaque motrice de la membrane musculaire, déclenchant un potentiel d'action et la contraction musculairequi s'ensuit.

 

Pourquoi analyser la JNM ?

  • Site précoce de la pathologie : les JNM sont touchées avant la perte des motoneurones dans de nombreuses maladies neurodégénératives (processus de « dépérissement »).
  • Lecture quantitative : permet de surveiller la dénervation, le remodelage et la réponse thérapeutique dans les modèles précliniques.
  • Accessibilité expérimentale : leur emplacement périphérique permet une imagerie et une analyse robustes, facilitant l'évaluation haute résolution de l'intégrité synaptique.

Dans cette vidéo, nous présentons un aperçu de notre technique de marquage et d'analyse des jonctions neuromusculaires (JNM). Elle comprend également un exemple illustratif de dénervation des JNM dans un modèle murin de SLA, démontrant comment nos services peuvent être utilisés pour mesurer la neurodégénérescence, surveiller la progression de la maladie et évaluer des thérapies potentielles dans le cadre d'études précliniques.

Quelle est la valeur de l'analyse de la jonction neuromusculaire dans les modèles animaux ?

La NMJ est très sensible aux changements d'innervation, aux altérations morphologiques et à la dégénérescence dans plusieurs maladies neuromusculaires. L'analyse NMJ dans les modèles animaux permet aux chercheurs de surveiller la progression de la maladie et d'évaluer l'efficacité des agents thérapeutiques expérimentaux dans les études précliniques.

Grâce à nos plateformes d'imagerie validées, à notre expertise scientifique et à notre vaste expérience, nous fournissons une quantification robuste et reproductible de la NMJ sur divers modèles et espèces. Nous mettons ici en évidence les altérations de la NMJ dans un modèle murin de SLA que nous utilisons régulièrement pour tester de nouvelles interventions thérapeutiques.

Modèles de sclérose latérale amyotrophique (SLA) et pathologie NMJ de la SLA

Un modèle animal optimal de la SLA (ou maladie du motoneurone [MND]) devrait présenter les caractéristiques clés suivantes :

  • Similitude des symptômes avec ceux de la SLA / MND humaine, y compris les déficits moteurs et la vulnérabilité de la jonction neuromusculaire
  • Évolution progressive de la maladie, permettant des études longitudinales de la pathologie
  • Modification de la maladie, permettant des interventions qui altèrent la progression de la maladie
  • Disponibilité d'animaux d'âge approprié pour les études précliniques
  • Faible variabilité entre les animaux, garantissant des résultats reproductibles entre les cohortes

Modèle TDP-43ΔNLS (rNLS8)

Le modèle murin TDP-43ΔNLS (rNLS8)répond à ces critères,ce qui enfait un système intéressant pour le développement de médicaments contre la SLA. Ce modèle exprime la protéine humaine TDP-43 avec un signal de localisation nucléaire (NLS) défectueux, ce qui altère l'importation nucléaire et entraîne une accumulation cytoplasmique de TDP-43 dans les neurones. Au fil du temps, cette protéine mal localisée forme des agrégats de TDP-43 phosphorylés, reproduisant les principales caractéristiques pathologiques observées chez les patients atteints de SLA.

 

Chez Biospective, nous utilisons à la fois la version originale et la version modifiée du modèle murin rNLS8 de la protéinopathie TDP-43 :

  • Modèle murin original (« Off Dox »): progression rapide de la maladie en quelques semaines
  • Modèle murin Biospective (« Low Dox »): progression plus lente de la maladie sur plusieurs mois  

Les deux modèles présentent une pathologie progressive, notamment :  

  • Dégénérescence des motoneurones et atrophie cérébrale régionale
  • Accumulation cytoplasmique de TDP-43 et agrégats de TDP-43 phosphorylée
  • Déficits moteurs
  • Pathologie du cerveau, de la moelle épinière et de la jonction neuromusculaire (JNM)

Pour plus d'informations, veuillez consulter nos ressources :

Comment la jonction neuromusculaire est-elle affectée dans le modèle murin TDP-43ΔNLS (rNLS8) de la SLA?

Les chercheurs scientifiques de Biospective ont mené une évaluation rigoureuse de l'intégrité et de la dénervation des jonctions neuromusculaires chez des souris transgéniques TDP-43. Cette étude a comparé des souris témoins tTA à des souris rNLS8 « Low Dox » huit semaines après l'induction du modèle.

Notre étude a démontré :

  • Une réduction significative de la colocalisation SV2A/α-bungarotoxine, indiquant une dénervation de la jonction neuromusculaire
  • Une diminution des projections axonales totales
  • Une architecture présynaptique simplifiée, reflétant une pathologie synaptique de type SLA

Ces résultats mettent en évidence le dysfonctionnement synaptique progressif au niveau de la jonction neuromusculaire et soutiennent l'utilisation de ce modèle murin pour l'évaluation préclinique d'interventions thérapeutiques visant à préserver la jonction neuromusculaire dans la SLA.

Dans l'« Image interactive » ci-dessous, vous trouverez les résultats de notre analyse NMJ, y compris des coupes tissulaires à immunofluorescence multiplexe haute résolution de muscles provenant du modèle murin « Low Dox » TDP-43ΔNLS (rNLS8) de Biospective et de souris témoins.

Vous pouvez faire un panoramique sur l'image à l'aide du bouton gauche de la souris. Vous pouvez zoomer et dézoomer à l'aide de la souris/du pavé tactile (haut/bas) ou des boutons + et - dans le coin supérieur gauche. Vous pouvez activer/désactiver, modifier la couleur et ajuster les paramètres d'image pour les canaux dans le panneau de configuration dans le coin supérieur droit.

Nous vous recommandons d'utiliser le mode plein écran pour une expérience interactive optimale.

Dénervation de la jonction neuromusculaire (NMJ) dans le modèle TDP-43ΔNLS (rNLS8) de la SLA

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https://ispproductionpublic.blob.core.windows.net/media/1e7a4868-236a-40a9-9d44-23d2a0c3437e/1e7a4868-236a-40a9-9d44-23d2a0c3437e

Auteurs: Pasquale Esposito, Robin Guay-Lord, Lionel Breuillaud, Kristina DeDuck, et Barry J. Bedell

La sclérose latérale amyotrophique (SLA) est une maladie neurodégénérative progressive caractérisée par la dégénérescence des motoneurones, entraînant une faiblesse musculaire, une paralysie et, à terme, une insuffisance respiratoire. Au début de la progression de la maladie, les jonctions neuromusculaires (JNM) — les connexions synaptiques entre les motoneurones et les muscles squelettiques — subissent des altérations structurelles et fonctionnelles qui précèdent la perte neuronale manifeste, ce qui, selon l'hypothèse, reflète un processus de « mort rétrograde » et une dénervation progressive.

Biospective a mis en œuvre une version à faible dose de doxycycline (« Low Dox ») du modèle murin TDP-43NLS (rNLS8) bien établi, permettant une induction contrôlée et progressive de la pathologie TDP-43 et d'une altération précoce des JNM. Dans ce modèle :

  • Les souris rNLS8 expriment la protéine humaine TDP-43ΔNLS sous le contrôle de la doxycycline du promoteur NEFH (neurofilament heavy).

  • Le protocole Low Dox induit une délocalisation et une agrégation progressives de la TDP-43 (y compris des inclusions cytoplasmiques phosphorylées) sur plusieurs semaines/mois, modélisant ainsi la pathologie progressive de la jonction neuromusculaire (NMJ).

  • La pathologie précoce de la NMJ reflète la vulnérabilité synaptique initiale hypothétique dans la SLA humaine.

Cette présentation interactive met en évidence les altérations structurelles de la jonction neuromusculaire dans le modèle Low Dox rNLS8, notamment :

  • Réduction des terminaisons présynaptiques

  • Perte d'alignement synaptique

  • Simplification de l'arborisation axonale

La souris rNLS8 est un modèle bigénique régulé par la doxycycline, généré par croisement de la lignée réceptrice tetO-hTDP-43ΔNLS avec la lignée conductrice NEFH-tTA, les souris de la même portée uniquement tTA servant de témoins. Pour cette étude, des coupes de tissu musculaire gastrocnémien fixées et congelées de 40 µm d'épaisseur provenant de N = 13 souris Low Dox rNLS8 et N = 13 souris témoins tTA ont été marquées pour les composants NMJ présynaptiques (SV2A, βIII-tubulin) et postsynaptiques (alpha-bungarotoxin), les noyaux étant contre-colorés à l'aide de DAPI. Cette approche d'immunofluorescence multiplexe a permis une analyse quantitative et spatiale de la dénervation, de l'alignement synaptique et de l'arborisation axonale, capturant ainsi les altérations subtiles de la NMJ qui précèdent la perte des motoneurones.

Pour naviguer dans cette histoire en images, vous pouvez utiliser les flèches et/ou l'icône Table des matières dans le coin supérieur droit de ce panneau.

Schéma indiquant les icônes de navigation pour cette présentation interactive

Vous pouvez également interagir à tout moment avec l'image microscopique dans la visionneuse d'images située à droite afin d'explorer plus en détail ces données haute résolution.

Aperçu de l'architecture NMJ dans le muscle gastrocnémien de la souris

Cette image microscopique haute résolution montre le marquage à l'α-bungarotoxin (α-BTX) des récepteurs postsynaptiques de l'acétylcholine (AChR) dans des coupes tissulaires de 40 µm d'épaisseur provenant du muscle gastrocnémien de souris. L'image met en évidence la distribution des jonctions neuromusculaires (JNM) à travers les fibres musculaires, chaque plaque motrice apparaissant comme une région compacte positive à l' α-BTX.

Graphique illustrant la différence de densité de coloration à l'alpha-bungarotoxine entre les souris Low Dox et les souris témoins.

Densité du signal α-BTX chez les souris tTA (témoins) par rapport aux souris Low Dox rNLS8 ; moyenne ± SEM. Il n'y a pas de différence significative entre les groupes.α-BTX signal density for tTA mice (control) compared to Low Dox rNLS8 mice; mean ± SEM. There is no significant difference between groups.

Marquage multiplex des composants présynaptiques et postsynaptiques de la jonction neuromusculaire

Cette image d'immunofluorescence multiplexe (mIF) montre l'α-BTX (AChR postsynaptiques), la SV2A (vésicules présynaptiques) et la βIII-tubulin (projections axonales) d'une souris témoin tTA. Chez les témoins tTA, une forte colocalisation SV2A–α-BTX (qui apparaît en jaune) indique une innervation intacte et un alignement synaptique correct. Chez les souris Low Dox rNLS8, le signal SV2A est réduit ou absent au niveau des plaques terminales α-BTX positives, ce qui indique une dénervation. Le marquage de la βIII-tubulin montre une diminution du signal axonal au niveau des sites NMJ, reflétant une atteinte précoce de l'intégrité axonale au niveau de la jonction.

À l'aide de notre analyse quantitative PERMITS™, nous avons mesuré à la fois le degré de chevauchement SV2A–α-BTX et la complexité de la ramification présynaptique. Les graphiques ci-dessous montrent que les souris Low Dox présentent une réduction significative de la complexité de la ramification présynaptique et une diminution du chevauchement entre α-BTX et SV2A par rapport aux souris témoins tTA, ce qui reflète une altération de l'intégrité synaptique et une dénervation progressive.

Graphique illustrant les différences d'innervation NMJ entre les souris Low Dox et les souris témoins.

Chevauchement SV2A/α-BTX (%) chez les souris tTA (témoins) par rapport aux souris Low Dox rNLS8 ; moyenne ± SEM, test t, **** p < 0,0001.

Graphique illustrant la différence de complexité des ramifications présynaptiques entre les souris Low Dox et les souris témoins.

Complexité des ramifications présynaptiques chez les souris tTA (témoins) par rapport aux souris Low Dox rNLS8 ; moyenne ± SEM, test t, **** p < 0,0001.

La classification des NMJ a été effectuée en fonction du pourcentage de signal SV2A chevauchant le marquage α-BTX, et ces catégories peuvent être visualisées directement sous forme de cases colorées dans les images microscopiques. Les NMJ entièrement dénervées ont été définies comme ayant un chevauchement SV2A/α-BTX de 0 à 20 %, indiquant un contact présynaptique minimal ou absent. Les NMJ partiellement innervées ont été définies comme ayant un chevauchement de 20 à 80 %, reflétant une couverture présynaptique réduite ou incomplète. Les NMJ entièrement innervées ont été classées comme ayant un chevauchement de 80 à 100 %, ce qui représente un alignement synaptique intact et une connectivité présynaptique préservée.

NMJ entièrement innervées dans le muscle gastrocnémien d'une souris tTA

Cette image microscopique à fort grossissement montre les jonctions neuromusculaires (JNM) d'une souris témoin tTA. On observe clairement des JNM entièrement innervées, dans lesquelles les signaux α-BTX et SV2A présentent un chevauchement spatial précis (en jaune), indiquant une couverture synaptique complète et une architecture de neurotransmission intacte.

À l'aide de l'analyse PERMITS™, nous avons quantifié la densité des NMJ entièrement innervées. Le graphique ci-dessous montre que les souris Low Dox ont un nombre significativement moins élevé de NMJ entièrement innervées par rapport aux souris témoins tTA.

Graphique illustrant la différence entre les souris Low Dox et les souris témoins en termes de jonctions neuromusculaires (JNM) entièrement innervées.

Densité NMJ entièrement innervée (définie comme un chevauchement de 80 à 100 % entre α-BTX et SV2A) pour les souris tTA (témoins) par rapport aux souris Low Dox rNLS8 ; moyenne ± SEM, test t, **** p < 0,0001.

NMJ dénervées dans le muscle gastrocnémien d'une souris Low Dox rNLS8

Cette image microscopique à fort grossissement montre des jonctions neuromusculaires dénervées chez une souris Low Dox rNLS8. Les groupes de récepteurs postsynaptiques de l'acétylcholine (α-BTX) restent visibles, mais les terminaisons présynaptiques (SV2A) sont nettement réduites ou absentes, ce qui indique une dénervation partielle et/ou complète des jonctions neuromusculaires.

À l'aide de l'analyse PERMITS™, des mesures quantitatives ont été effectuées pour examiner la densité des NMJ partiellement innervées et complètement dénervées. Les graphiques ci-dessous montrent que les souris Low Dox présentent un nombre significativement plus élevé de NMJ partiellement innervées et complètement dénervées par rapport aux témoins tTA.

Graphique illustrant la différence entre les jonctions neuromusculaires partiellement innervées chez les souris Low Dox et les souris témoins.

Densité des jonctions neuromusculaires partiellement innervées (définies comme un chevauchement de 20 à 80 % entre α-BTX et SV2A) chez les souris tTA (témoins) par rapport aux souris Low Dox rNLS8 ; moyenne ± SEM, test t, ** p < 0,01.

Graphique illustrant la différence entre les jonctions neuromusculaires partiellement innervées chez les souris Low Dox et les souris témoins.

Densité des jonctions neuromusculaires partiellement innervées (définies comme un chevauchement de 20 à 80 % entre α-BTX et SV2A) chez les souris tTA (témoins) par rapport aux souris Low Dox rNLS8 ; moyenne ± SEM, test t, ** p < 0,01.

Densité axonale réduite dans le muscle gastrocnémien chez la souris Low Dox rNLS8

Cette image microscopique montre une densité réduite des axones moteurs chez une souris Low Dox rNLS8, signe précoce d'une pathologie axonale distale avant une dénervation manifeste. Le marquage de la βIII-tubulin et de la SV2A révèle moins de ramifications axonales se projetant vers les plaques terminales postsynaptiques, avec des réseaux présynaptiques fragmentés et des terminaisons raccourcies par rapport aux témoins.

À l'aide de l'analyse PERMITS™, les projections axonales totales ont été quantifiées. Le graphique ci-dessous montre que les souris Low Dox ont significativement moins de projections axonales que les témoins tTA.

Graphique illustrant la différence entre les projections axonales totales chez les souris Low Dox et les souris témoins.

Projections axonales totales pour les souris tTA (témoins) par rapport aux souris Low Dox rNLS8 ; moyenne ± SEM, test t, **** p < 0,0001.

Estimations de la taille de l'échantillon pour détecter les changements au niveau de la NMJs

Le tableau ci-dessous résume nos estimations de la taille de l'échantillon nécessaire pour détecter les changements entre les souris tTA témoins et les souris Low Dox en termes de chevauchement SV2A–α-BTX, de complexité des ramifications présynaptiques et de projections axonales totales. La taille des échantillons a été estimée à partir des changements observés et des écarts-types calculés à partir de N = 13 souris dans chacun des deux groupes. On estime que moins de 15 souris par groupe sont nécessaires pour détecter une signification statistique pour une différence observée de 25 % entre les groupes dans le chevauchement SV2A–α-BTX, et que moins de 10 et moins de 5 souris par groupe sont nécessaires pour détecter respectivement des différences de 33 % et 50 % entre les groupes.

Tableau présentant les estimations de la taille des échantillons

Estimations de la taille de l'échantillon (nombre de souris/groupe) pour la détection de différences statistiquement significatives dans le chevauchement SV2A–α-BTX, la complexité des ramifications présynaptiques et les projections axonales totales entre les souris tTA (témoins) et les souris Low Dox rNLS8. La zone ombrée en vert indique qu'un échantillon de 1 à 15 souris/groupe est nécessaire, la zone ombrée en vert clair indique qu'un échantillon de 15 à 30 souris/groupe est nécessaire, et la zone ombrée en jaune indique qu'un échantillon de 30 à 45 souris/groupe est nécessaire pour détecter les différences observées entre les groupes.

Évaluations multimodales de la structure et de la fonction de la NMJ dans le modèle TDP-43NLS

Outre l'innervation NMJ et les changements structurels mis en évidence ici, nous avons quantifié l'atrophie musculaire à l'aide d'une imagerie CT longitudinale in vivo non invasive, évalué l'électrophysiologie musculaire par EMG (mesure de l'amplitude et de la latence CMAP) et évalué la faiblesse musculaire à l'aide de tests de force de préhension, qui reflètent tous les caractéristiques cliniquement pertinentes de la SLA humaine.

Graphique illustrant l'évolution du volume musculaire entre les souris Low Dox et les souris témoins sur une période de 10 semaines après l'induction du modèle.

Variation du volume musculaire des membres postérieurs chez les souris Low Dox par rapport aux souris témoins sur une période de 10 semaines après l'induction du modèle ; moyenne ± SEM.

Graphique illustrant la différence d'amplitude maximale du CMAP chez les souris Low Dox 10 semaines après l'induction du modèle.

Amplitude maximale du potentiel d'action musculaire composé (CMAP) mesurée chez des souris Low Dox au départ (avant induction du modèle) et 10 semaines après induction du modèle ; moyenne ± SEM, test t, **** p < 0,0001

Graphique illustrant la différence de latence CMAP chez les souris Low Dox 10 semaines après l'induction du modèle.

Latence du potentiel d'action musculaire composé (CMAP) mesurée chez des souris Low Dox au départ (avant induction du modèle) et 10 semaines après induction du modèle ; moyenne ± SEM, test t, **** p < 0,0001

Graphique illustrant la différence de force de préhension entre les souris Low Dox et les souris témoins.

Force de préhension moyenne chez les souris Low Dox 8 semaines après l'induction par rapport aux souris témoins ; moyenne ± SEM, test t, **** p < 0,0001.

Résumé

Ce modèle murin TDP-43 régulé par la doxycycline (rNLS8) reproduit les principales caractéristiques de la pathologie précoce de la SLA, notamment la perturbation progressive de la jonction neuromusculaire (JNM), qui se manifeste par une dénervation partielle ou totale et une réduction des projections axonales au niveau des sites de la JNM, précédant la perte manifeste de motoneurones.

Le protocole Low Dox de Biospective induit une dérégulation progressive de la TDP-43 et une agrégation cytoplasmique sur plusieurs semaines, entraînant une diminution mesurable de la ramification présynaptique et de l'innervation de la jonction neuromusculaire par rapport aux contrôles tTA.

Combiné à une coloration tissulaire automatisée et à une imagerie et une analyse à haut débit, le modèle inductible rNLS8 TDP-43ΔNLS permet une évaluation précise et quantitative de la pathologie de la NMJ et des axones, ce qui en fait une plateforme idéale pour l'évaluation préclinique de thérapies ciblant les déficits synaptiques précoces dans la SLA.

N'hésitez pas à explorer davantage les images microscopiques dans la visionneuse.

Nous serions ravis de discuter avec vous de ce modèle murin de SLA, de sa caractérisation et de notre analyse NMJ. N'hésitez pas à nous contacter.

https://ispproductionpublic.blob.core.windows.net/media/1e7a4868-236a-40a9-9d44-23d2a0c3437e/1e7a4868-236a-40a9-9d44-23d2a0c3437e
Table des matières
Panneau de contrôle
Section: tTA Control
Segmentations
Canaux

Image interactive présentant les résultats de l'analyse NMJ, avec des coupes musculaires à immunofluorescence multiplexe haute résolution provenant du modèle murin « Low Dox » TDP-43ΔNLS (rNLS8) de Biospective, ainsi que des tissus témoins.

Comment l'automatisation améliore-t-elle les résultats?

Nous utilisons la marquage et l'analyse automatisées des jonctions neuromusculaires à l'aide de plateformes avancées d'imagerie et de quantification à haut débit. Cette approche garantit une évaluation précise et reproductible de la structure et de l'intégrité des jonctions neuromusculaires sur plusieurs échantillons et dans différentes conditions expérimentales.

Comparaison entre la marquage et l'analyse manuelles et automatisées de la jonction neuromusculaire

Caractéristique

Manuelle

Automatique

Cohérence de la marquage

Incubation variable des anticorps et distribution inégale des réactifs

Contrôle précis du temps, de la température et de l'application des réactifs

Rendement et efficacité

Analyse de lames chronophage et en nombre limité

Marquage, imagerie et traitement des données à haut débit

Reproductibilité

Variabilité dépendante de l'opérateur dans la marquage et l'analyse

Protocoles standardisés et quantification NMJ basée sur des algorithmes

Exactitude des données et
profondeur de l'analyse

Évaluation subjective de la NMJ ; précision quantitative limitée

Segmentation, localisation et analyse morphologique automatisées

Profilage morphologique

Mesure manuelle de la taille, de la forme et de la complexité de la NMJ

Extraction automatisée des mesures de la surface, du périmètre, de la ramification et de la complexité de la jonction neuromusculaire

Cartographie spatiale

Limitée aux régions d'intérêt (ROI) sélectionnées

Cartographie complète de la distribution des jonctions neuromusculaires et de la couverture synaptique

Ce tableau compare la marquage et l'analyse manuelles et automatisées des jonctions neuromusculaires (NMJ) selon des critères clés, notamment la cohérence de la marquage, le débit et l'efficacité, la reproductibilité, la précision des données et la profondeur de l'analyse, le profil morphologique et la cartographie spatiale.

Images des muscles NMJ dans une disposition de montage

Exemples d'images de jonctions neuromusculaires provenant de muscles de souris ayant subi une marquage et une analyse d'image automatisées à l'aide des procédés développés par Biospective.

Pour discuter de vos besoins en matière d'études ou demander un devis pour des services de marquage et de quantification de la jonction neuromusculaire (JNM),

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FAQs

Qu'est-ce qu'unejonction neuromusculaire ?

Quelles maladies et affections touchent la jonction neuromusculaire ?

Comment la jonction neuromusculaire est-elle affectée dans les troubles neurodégénératifs ?

Comment étudierla morphologie de la jonction neuromusculaire ?

Est-il possible d'étudier la jonction neuromusculairede manière longitudinale ?

Quels sont les biomarqueurs complémentaires permettant d'étudier les maladies liées à la jonction neuromusculaire ?

Références

Mots clés

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Informations actualisées sur les services de marquage et d'analyse NMJ.

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