Modèle d'ensemencement des fibrilles d'alpha-synucléine (système limbique)
Injection de PFFs d'α-synucléine dans le Noyau Olfactif Antérieur (AON) pour générer un modèle avec altération du sommeil, atrophie cérébrale et neuroinflammation.
Présentation du modèle
Dans ce modèle, nous procédons à l'inoculation stéréotaxique de fibrilles préformées recombinantes (PFF) dans le noyau olfactif antérieur (AON) de souris M83 [B6;C3-Tg(Prnp-SNCA*A53T)83Vle/J]. Le ciblage de l'AON se justifie notamment par le fait qu'il s'agit de l'un des premiers noyaux olfactifs:
- C'est l'un des premiers sites où l'on observe une pathologie de la synucléine dans la maladie de Parkinson humaine (stade 1 de Braak).
- Les symptômes non moteurs associés au système limbique (par exemple, hyposmie/anosmie, altérations du sommeil) sont des symptômes prévalents et précoces de la maladie de Parkinson.
- L'AON est connecté à plusieurs régions cérébrales ipsilatérales et contralatérales, y compris des connexions directes (1er ordre) avec le bulbe olfactif, l'amygdale, le cortex piriforme, et des connexions d'ordre supérieur, telles que le cortex entorhinal et l'hippocampe. Nombre de ces régions sont très vulnérables à la neurodégénérescence.
Modèle spatial de propagation de la pathologie α-synucliène après injection stéréotaxique de fibrilles préformées recombinantes dans le noyau olfactif antérieur (AON).L'un des principaux avantages de ce modèle est qu'il reproduit de nombreux aspects de la maladie de Parkinson chez l'humain, notamment:
- Propagation hautement reproductible de l'α-synucléine selon un schéma spatio-temporel bien défini, entraînant une pathologie étendue de l'α-synucléine dans les corps cellulaires neuronaux et les neurites
- Forte composante neuroinflammatoire (microgliose et astrogliose)
- Neurodégénérescence et atrophie cérébrale régionale
- Changements comportementaux mesurables, tels que l'altération des cycles de sommeil et d'éveil
- Possibilité de modifier la maladie par une intervention thérapeutique
Génération de modèles
Un schéma général pour la génération de modèles PFF est le suivant:
Nous avons obtenu une licence pour les souris transgéniques M83. Nous maintenons une colonie de reproduction bien établie en interne à Biospective, ce qui nous permet de mener des études à grande échelle (>100 souris).
Pour ce modèle spécifique, nous élevons et vieillissons des souris mâles M83+/- jusqu'à l'âge de 8 à 12 semaines. Nous procédons ensuite à l'injection stéréotaxique de PFFs d'α-synucléine humaine recombinante soniquée dans l'AON. Nous utilisons des appareils stéréotaxiques numériques avec des micro-injecteurs automatisés pour une précision et une exactitude élevées.
Ce modèle est hautement reproductible avec un taux de réussite de près de 100% pour l'ensemencement des PFF.
Nos mesures validées
- Poids corporel
- Scores cliniques
- Analyse du sommeil
- Atrophie cérébrale par IRM (Pour en savoir plus, consultez notre présentation - Analyse de l'atrophie cérébrale dans des modèles de rongeurs atteints de maladies neurodégénératives)
- Imagerie TEP FDG de l'hypométabolisme cérébral du glucose
- Mesures du neurofilament à chaîne légère (NfL) dans le plasma et le LCR
- Immunohistochimie et immunofluorescence multiplexe (Lire la suite de notre présentation - Activation microgliale dans un modèle de souris α-synucléine de la maladie de Parkinson)
Coloration par immunohistochimie de l'α-synucléine phosphorylée du cortex piriforme ipsilatéral (gauche) et contralatéral (droite) 12 semaines après l'injection stéréotaxique unilatérale de fibrilles préformées d'α-synucléine dans le noyau olfactif antérieur d'une souris M83+/-.
En savoir plus sur la caractérisation de ce modèle et sur les mesures validées.
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Oui. Nous observons des niveaux très élevés de neurofilament à chaîne légère (NfL) dans le plasma et le LCR.
Nous observons également une atrophie cérébrale très importante de plusieurs régions, telles que le cortex piriforme et le cortex entorhinal, par IRM in vivo (voir Analyse de l'atrophie cérébrale dans des modèles de rongeurs atteints de maladies neurodégénératives).